Pesquisadores produzem primeiro leão africano embriões in vitro após vitrificação de oócitos imaturo

Uma equipe de cientistas do Instituto Leibniz de Pesquisa em Zoo e Vida Selvagem (Leibniz-IZW) na Alemanha, Givskud Zoo - Zootopia na Dinamarca e da Universidade de Milão na Itália conseguiu produzir os primeiros embriões in vitro de leões africanos após a vitrificação de oócitos imaturos. Para este método específico de criopreservação, os oócitos são coletados diretamente depois que um animal é castrado ou falecido e imediatamente congelado a -196°C em nitrogênio líquido.



Esta técnica permite o armazenamento de oócitos de animais valiosos por um tempo ilimitado, para que possam ser usados para produzir descendentes com a ajuda de técnicas de reprodução assistida. O objetivo é melhorar ainda mais e aplicar esses métodos para salvar espécies altamente ameaçadas, como o leão asiático da extinção. A pesquisa atual sobre leões africanos como espécie modelo é um passo importante nessa direção. Os resultados são relatados na revista científica "Criobiology".


Os oócitos-leão são presumidamente muito sensíveis ao resfriamento devido ao seu alto teor lipídedo, resultando em um mau reavivamento após o resfriamento lento. A vitrificação pode contornar esse problema, pois as células são congeladas a velocidades ultrarrápidas em soluções com uma concentração muito alta de agentes crioprotetores. Este método impede a formação de cristais de gelo nas células, o que poderia destruí-los, e permite que eles permaneçam intactos por um tempo ilimitado para permitir seu uso mais tarde.


Para a presente pesquisa, os cientistas coletaram oócitos de quatro leoas africanas do Zoológico de Givskud - Zootopia depois que os animais foram eutanizados para fins de manejo populacional. Metade dos oócitos (60) foram vitrificados instantaneamente. Após seis dias de armazenamento em nitrogênio líquido, os oócitos vitrificados foram descongelados e submetidos à insecratura em uma incubadora a 39°C por um total de 32-34 horas. A outra metade (59) foi utilizada como grupo controle e diretamente submetida à inse vitromaturação sem um passo de vitrificação. Oócitos maduros de ambos os grupos foram então fertilizados com esperma congelado de machos-leão africanos.



Do grupo vitrificado, sete embriões primitivos se desenvolveram, enquanto no grupo controle apenas três embriões se desenvolveram. "Pelo que sabemos, esta é a primeira vez que os in-vitroembryos foram produzidos após a vitrificação de oócitos de leão africano ou qualquer outra espécie de gato selvagem", diz Martina Colombo, da Universidade de Milão, e cientista convidada da Leibniz-IZW.


Em um estudo científico recente sobre o gato doméstico, realizado em cooperação com colegas da Universidade de Milão e da Universidade de Medicina Veterinária de Viena, a equipe de biologia de reprodução do Leibniz-IZW demonstrou que uma vitrificação imediata no local de oócitos felídeos é a melhor opção para obter um alto número de gametas de boa qualidade e, consequentemente, um maior número de embriões em desenvolvimento.


Este estudo também foi publicado na Criobiologia. A vitrificação no local é especialmente útil se as amostras forem coletadas da vida selvagem mantidas em zoológicos e, em seguida, precisarem ser transportadas para um laboratório adequado. "O transporte de oócitos frescos e tecido ovariano através das fronteiras internacionais é muitas vezes complexo e crítico em termos de tempo, enquanto a vitrificação no local dos oócitos permite um período de tempo seguro para o transporte. Os oócitos podem ser fertilizados posteriormente, uma vez que foram transportados para um laboratório adequado e o esperma de um macho está disponível", explica Zahmel.


A presente pesquisa demonstra vitrificação bem sucedida, in vitromaturação e fertilização de oócitos de leão africanos para banco de recursos genéticos. No entanto, nenhum dos primeiros embriões de oócitos vitrificados se desenvolveu além do estágio de 4 células.


Esclarecer os caminhos afetados pela vitrificação seria importante para entender melhor as necessidades específicas que os oócitos vitrificados podem ter após o descongelamento. "Embora o desenvolvimento de embriões ainda tenha sido prejudicado, nossos resultados dão esperança de que os oócitos felídeos possam ser criopreservados e armazenados em biobancos no futuro", diz Katarina Jewgenow, Chefe do Departamento de Biologia da Reprodução da Leibniz-IZW. "Nosso objetivo é melhorar ainda mais esses métodos em espécies modelo, como gatos domésticos e leões africanos, a fim de usá-los um dia para a reprodução assistida de felídeos ameaçados, como o leão asiático", acrescenta Jewgenow.




Fonte: News Medical

Forschungsverbund Berlin e.V. (FVB)

Referência do diário:

Zahmel, J., et al. (2020) Maturação e fertilização de oócitos de leão africano (Panthera leo) após vitrificação. Criobiologia. doi.org/10.1016/j.cryobiol.2020.11.011.

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